15号展览厅展出了达芬奇早期的作品，其中有著名的《天使报喜图》。这幅作品显示了他日益凸现的才华。1481年他开始创作《麦琪的礼拜》，在未完成前便离开了佛罗伦萨去了米兰去完成《最后的晚餐》。18号展览厅以其中的《护民官》非常有名，这副画创作于1584年，是为了进贡给当时最受欢迎的梅第奇家族当作收藏品。而其中最有名的则是梅第奇·维纳斯，一座罗马人摹仿希腊雕塑的作品，在古代这座雕塑被看作是异教徒的情色之作。这座复制品被证明是低俗的并奉教皇科斯摩三世的命令从罗马的梅第奇别墅中移走以免危害了城中研究艺术的学者。18号展览厅其他的大作包括布隆基诺的《科斯摩一世》 和《托莱多的埃莱诺拉》的肖像画，这两幅都作于1545年。还有1530年的《波特摩的慈善》（Pontormo’s Charity）和1517年《维科多》（Cosimo il Vecchio）肖像画。19到23号展厅的画廊摆脱了对佛罗伦萨画派的偏爱，证实着文艺复兴的理念和技术怎样快速地传到托斯卡纳州以外的地方。从德国、佛兰得、翁布里亚来的画家也有着很好的作品，比如秘鲁吉诺的作品（Perugino）。但是最有名的作品可能是由来自威尼斯和意大利北部的艺术家比如马蒂纳（Mantegna）、卡帕西诺（Carpaccio）、克雷吉诺（Correggio）和贝利尼（Bellini）所创作的。25号展厅则回归到托斯卡纳主流，如米开朗基罗的《神圣的家族》（Holy Family） 和《多尼特多》（Doni Tondo），由于其充满活力的色彩和扭曲的姿态而变得著名。作为画廊中米开朗基罗的唯一作品，这副画对下一代的画家产生了巨大的影响，比如在对布隆齐诺，波特摩（Pontormo）和帕米吉尼诺（Parmigianino）的作品上。29号展厅中的《圣母领报》可以算得上是集大成之作，它所显示出的扭曲的解剖手法、奇异的色彩和奇特的构成法表明这幅画是被称作风格主义画风中的一幅杰出作品。在26和28号展厅中展出了一些早期的但不是很有名的作品，其中包括拉菲尔的《金丝雀的圣母》和提香的《花神爱丽莱特》，后者曾被马克·吐温责斥为“世上拥有图画中最粗糙的、最卑鄙可耻的最下流的作品。”而有的人则认为这幅画是最杰出的裸体画之一。